CEINFINITE Масс - спектрометрическая прямая полноколонная визуализация и эквивалентная электрическая фокусировка iCIEF

CEINFINITE Масс - спектрометрическая прямая полноколонная визуализация и эквивалентная электрическая фокусировка iCIEF

CEINFINTE Масс - спектрометрическая прямая полноколонная визуализация и изоэлектрическая фокусировка iCIEF

CEInfinite iCIEF-MS Онлайновая платформа

В разработке и производстве белковых биологических продуктов, благодаря постпереводной модификации(ПТМ) и разлагается, генерируя заряд целевого белкаИзоморфизмТело. БиофармацевтикакомпанияОпираясь на капиллярную электрическую фокусировку.(CIEF) и CIEF (iCIEF) для количественной оценки изомеров заряда. Представление биоизомеров заряда полезно на многих этапах жизненного цикла, включая выбор клеточной линии, исследования стабильности, рецептуры ипроцессКонтроль, но этот признак требует разделения белков на отдельные заряды с достаточной чистотой.Фрагмент изомераДля использования в анализе вниз по течению.

Кроме того, прямая связь iCIEF с масс - спектрометром (MS), используемым для представления, значительно упростит процесс представления.

Компания AES разработала подготовленную CEInfinite систему iCIEF и проприетарную колонну для обнаружения изображений (WCID) для разделения iCIEF - WCID и сетевой связи с MS, что позволяет наблюдать в режиме реального времени динамику разделения фокусировки (iCIEF) и последующее перемещение пиков изомеров заряда. Во время миграции давления электрическое поле удерживает образцы в разделенных капиллярах в фокусе. Внутренний диаметр разделенных капилляров больше, а внутренний диаметр передающих капилляров меньше. Таким образом, эта разница в внутреннем диаметре значительно уменьшает диффузию и повторное смешивание отдельных белковых изомеров при выходе из колонны.

Подробная информация

Основные моменты CEInfinite iCIEF - MS

• Прямое подключение iCIEF - MS к традиционным низкопоточным или высокочувствительным нанопотокам ESI Thermo Fisher Scientific, Waters и Bruker.

• Любой буфер или раствор может быть использован в качестве добавки. Не связано с химической миграцией. Варианты белкового заряда вводятся в MS последовательно в зависимости от pI.
  

• CE - MS может быть преобразован непосредственно из любого существующего метода iCIEF или CIEF. При низких и высоких концентрациях проб можно получить хорошую степень разделения.

iCIEF - MS анализ образцов NIST mAb

iCIEF - UV (красный) и iCIEF - MS (синий) позволяют четко наблюдать профиль изомеров заряда и получают превосходную спектральную карту MS для всех пиков вариаций, что позволяет нам решать свертки большинства полных вариантов заряда NIST mAb.

Результаты показали, что щелочные пики B1 и B2 в основном вызваны изомеризацией лизина на C - конце, а молекулярная масса кислотного пика A1 менее различна по сравнению с основным пиком, возможно, из - за таких модификаций, как деамид, которые требуют дальнейшего изучения и подтверждения с помощью подготовленного типа iCIEF.

Оценки клиентов:

"iCIEF играет важную роль в мониторинге изменений заряда в процессе разработки биофармацевтических препаратов. CEInfinite позволяет нам получать показания качества для вариантов продуктов, обнаруженных iCIEF, что в значительной степени помогает понять химические свойства переменных зарядов. При использовании CEInfinite в сочетании с высокоточной масс - спектрометрией высокого разрешения, предоставляемой системой Orbitrap MS, можно получить подробное представление о вариантах продукта и стабильности продукта.

Короче говоря, iCIEF - MS, использующий CEInfinite, является очень мощным индикаторным инструментом для разработки биофармацевтических препаратов. "

Д - р Дан Бах Кристенсен

Главный научный сотрудник Symphogen